升压素生物检定法
附录Ⅻ                       A 升压素生物检定法

    本法系比较垂体后叶标准品(S)与供试品(T)两者引起大鼠血压升高的程度，以测定供试品的效价。
    标准晶溶液的配制  迅速、精密称取垂体后叶标准品适量，注意避免吸潮，先加少量0.25％醋酸溶液，
仔细研磨，移置硬质大试管中，再精密加入0.25％醋酸溶液使成每1ml中含升压素1单位的溶液，管口轻放
一玻璃塞，浸入沸水浴中，时时振摇，加热(煮沸)5分钟取出，迅速冷却，滤过，滤液分装于适宜的容器中，4～
8℃贮藏，如无沉淀析出，可在3个月内使用。
    标准品稀释液的配制  试验当日，精密量取标准品溶液适量，加氯化钠注射液制成两种浓度的稀释液，
高低剂量的比值(γ)一般不得大于1：0.6，调节剂量使低剂量能引起血压升高，高剂量应不致使血压升高达
到极限。
    供试品溶液与稀释液的配制  按供试品的标示量或估计效价(A<[T]>)，照标准品溶液与稀释液的配制法配
成两种浓度的稀释液，其比值(γ)应与标准品相等，标准品与供试品高低剂量所致的反应均值应相近。
    检定法  取健康合格，体重300g以上的成年雄性大鼠，用适宜的麻醉剂(如腹腔注射乌拉坦1g/kg)麻
醉后，固定于保温手术台上，分离气管，必要时插入气管插管，以使呼吸畅通。在一侧颈静脉或股静脉插入静
  脉插管，供注射药液用，按每100g体重注入肝素溶液50～100单位。然后剥离另一侧颈动脉，插入与血压计
  相连的动脉插管，在血压计与插管通路中充满氯化钠注射液，并于动脉插管中注入适量肝素(约200～400单
  位)抗凝，全部手术完毕后，将血压计调节到与动物血压相当的高度，开启动脉夹，记录血压。缓缓注入适宜的
  交感神经阻断药(如酚妥拉明，按大鼠每100g体重注人0.1mg，隔5～10分钟用相同剂量再注射一次)，待血
  压稳定后，即可进行药液注射，各次药液的注射速度应基本相同，并于每次注射后立即注入氯化钠注射液
  0.3～0.5ml。每次注射应在前一次注射的反应基本稳定以后进行，相邻两次注射的间隔时间应相同(约10～
  15分钟)。标准品稀释液和供试品稀释液各取高低两个剂量(ds<[1]>、ds<[2]>，dT<[1]>、dT<[2]>)为一组，按随机区组设计的次
  序轮流注入，每组4个剂量，重复4～6组。测量各剂量所致血压升高的高度，照生物检定统计法(附录ⅪⅤ)中
  的量反应平行线测定法计算效价及实验误差。
    本法的可信限率FL(％)不得大于20％。

DrugFuture.Com in English - Chinese