溶液颜色检查法
附录Ⅸ                           A 溶液颜色检查法

    第一法                                                                  
    除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解，置于25ml的纳氏比色管
中，加水稀释至10ml。另取规定色调和色号的标准比色液10ml，置于纳氏比色管中，两
管同置白色背景上，自上向下透视，或同置白色背景前，平视观察；供试品管呈现的颜
色与对照管比较，不得更深。            
    比色用重铬酸钾液  取重铬酸钾，研细后，在120℃干燥至恒重,精密称取0.4000g,
置500ml量瓶中， 加适量水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。每1ml溶液中含0.800mg的
K2Cr2O7。                            
    比色用硫酸铜液  取硫酸铜约32.5g,加适量的盐酸溶液(1→40)使溶解成500ml，精
密量取10ml，置碘量瓶中,加水50ml、醋酸4ml与碘化钾2g,用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol
/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml,继续滴定至蓝色消失。每1ml硫代硫酸钠滴定
液(0.1mol/L)相当于24.97mg的CuSO4·5H2O。根据上述测定结果，在剩余的原溶液中加
适量的盐酸溶液(1→40)，使每1ml溶液中适含62.4mg的CuSO4·5H2O，即得。                             
    比色用氯化钴液  取氯化钴约32.5g，加适量的盐酸溶液(1→40)使溶解成500ml,精
密量取2ml，置锥形瓶中，加水200ml，摇匀，加氨试液至溶液由浅红色转变至绿色后，
加醋酸-醋酸钠缓冲液(pH6.0)10ml，加热至60℃，再加二甲酚橙指示液5滴,用乙二胺四
醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液显黄色.每1ml乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mo
l/L)相当于11.90mg的CoCl2·6H2O。根据上述测定结果，在剩余的原溶液中加适量的盐
酸溶液(1→40)，使每1ml溶液中适含59.5mgCoCl2·6H2O，即得。
    各种色调标准贮备液的制备  按下表量取比色用氯化钴液、比色用重铬酸钾液、比
色用硫酸铜液与水，摇匀，即得。                                      
              各种色调标准贮备液的配制表                                    
────┬───────┬────────┬───────┬────        
 色  调 │比色用氯化钴液│比色用重铬酸钾液│比色用硫酸铜液│   水           
        │     ml       │       ml       │       ml     │  ml          
────┼───────┼────────┼───────┼────        
 黄绿色 │    1．2      │     22．8      │      7．2    │68．8        
────┼───────┼────────┼───────┼────        
 黄  色 │    4．0      │     23．3      │      0       │72．7        
────┼───────┼────────┼───────┼────        
 橙黄色 │    10．6     │     19．0      │      4．0    │66．4        
────┼───────┼────────┼───────┼────        
 橙红色 │    12．0     │     20．0      │      0       │68．0        
────┼───────┼────────┼───────┼────        
 棕红色 │    22．5     │     12．5      │      20．0   │45．0        
────┴───────┴────────┴───────┴────        
    各种色调色号标准比色液的制备  按下表量取各色调标准贮备液与水，摇匀，即得。                                 各种色调色号标准比色液的配制表                                
────┬──┬──┬──┬──┬──┬──┬──┬──┬──┬──        
  色 号 │ 1  │ 2  │ 3  │ 4  │ 5  │ 6  │ 7  │ 8  │ 9  │10          
────┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──        
 贮备液 │0.5 │1.0 │1.5 │2.0 │2.5 │3.0 │4.5 │6.0 │7.5 │10.0        
  (ml)  │    │    │    │    │    │    │    │    │    │            
────┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──┼──        
 加水量 │9.5 │9.0 │8.5 │8.0 │7.5 │7.0 │5.5 │4.0 │2.5 │ 0          
  (ml)  │    │    │    │    │    │    │    │    │    │            
────┴──┴──┴──┴──┴──┴──┴──┴──┴──┴──        
    第二法                                                                  
    除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成10ml, 必要时滤过，
滤液照分光光度法于规定波长处测定，吸收度不得超过规定值。
    第三法（色差计法）
    本法是通过色差计直接测定溶液的透射三刺激值，对其颜色进行定量表述和分析
的方法。当目视比色法较难判定供试品与标准比色液之间的差异时，应考虑采用本法
进行测定与判断。
    供试品与标准比色液之间的颜色差异，可以通过分别比较它们与水之间的色差值
来得到，也可以通过直接比较它们之间的色差值来得到。
    现代颜色视觉理论认为，在人眼视网膜上有三种感色的锥形细胞，分别对红、绿、
蓝三种颜色敏感。颜色视觉过程可分为两个阶段：第一阶段，视网膜上三种独立的锥
形感色物质，有选择地吸收光谱不同波长的辐射，同时每一物质又可单独产生白和黑
的反应，即在强光作用下产生白的反应，无外界刺激时产生黑的反应；第二阶段，在
神经兴奋由锥体感受器向视觉中枢的传导过程中，这三种反应又重新组合，最后形成
三对对立性的神经反应，即红或绿、黄或蓝、白或黑的反应。最终在大脑皮层的视觉
中枢产生各种颜色感觉。
    自然界中的每种颜色都可以用选定的、能刺激人眼中三种受体细胞的红、绿、蓝
三原色，按适当比例混合而成。由此引入一个新的概念——三刺激值，即在给定的三
色系统中与待测色达到色匹配所需要的三个原刺激量,分别以X、Y、Z表示。通过对众
多具有正常色觉的人体（称为标准观察者，即标准眼）进行广泛的颜色比较试验，测
定了每一种可见波长(380～780nm)的光引起每种锥体刺激的相对数量的色匹配函数，
这些色匹配函数分别用x(λ)y(λ)z(λ)来表示。把这些色匹配函数组合起来,描绘曲
线,就叫做CIE色度标准观察者的光谱三刺激值曲线（见图1）。
    色匹配函数和三刺激值间的关系以下列方程表示：
        X=K∫S(λ)P(λ)x(λ)d(λ)
        Y=K∫S(λ)P(λ)x(λ)d(λ)
        Z=K∫S(λ)P(λ)x(λ)d(λ)
式中    K为归化系数；
        S(λ)为光源的相对光谱功率分布；
        P(λ)为物质色的光谱反射比或透射比； 
        x(λ)y(λ)z(λ)为标准观察者的色匹配函数；
        d(λ)为波长间隔，一般采用10nm或5nm。     
    当某种颜色的三刺激值确定之后，则可用其计算出该颜色在一个理想的三维颜色
空间中的坐标，由此推导出许多组的颜色方程（称为表色系统）来定义这一空间。如：
CIE1931-XYZ表色系统，CIE1964补充标准色度系统，CIE1976L<*>a*b*色空间(CIELab
均匀色空间)，Hunter表色系统等。
    为便于理解和比对，人们通常采用CIELab均匀色空间来表示颜色及色差。该色空
间由直角坐标L<*>a*b*构成。在三维色坐标系的任一点都代表一种颜色，其与参比点
之间的几何距离代表两种颜色之间的色差（见图2）。相等的距离代表相同的色差值。
用仪器对一个供试品与标准比色液的颜色进行比较时，需比较的参数就是空白对照品
的颜色和供试品或标准比色液颜色在均匀色空间中的差值。
    在CIELab均匀色空间中,三维色坐标L<*>a*b*与三刺激值X、Y、Z和色差之间的关
系如下：
    明度指数L<*>=116×(Y/Yn)<1/3>－16
    色品指数a*=500×[(X/Xn)<1/3>－(Y/Yn)<1/3>]
    色品指数b*=200×[(Y/Yn)<1/3>－(Z/Zn)<1/3>]
    色差△E<*>=(△L<*><2>＋(△a*)<2>＋(△b*)<2>
    以上公式仅适用于X/Xn、Y/Yn、Z/Zn＞0.008856时。
式中    X、Y、Z为待测样品的三刺激值；
        Xn、Yn、Zn为完全漫反射体的三刺激值；
        △E<*>为供试品色与标准比色液色的色差；
        △L<*>为供试品与标准比色液色的明度指数之差，其中△L<*>为正表示供试
品比标准色液颜色亮（鲜艳）；
        △a*、△b*为供试品色与标准比色液色的色品指数之差，其中△a*、△b*为
正表示供试品比标准比色液颜色更深（饱和）。
    色差计的工作原理简单地说即是模拟人眼的视觉系统，利用仪器内部的模拟积分
光学系统，把光谱光度数据的三刺激值进行积分而得到颜色的数学表达式，从而计算
出L<*>、a*、b*值及对比色的色差。图4为色差计的工作示意图。在仪器使用的标准
光源与日常观察样品所使用光源光谱功率分布一致（比如昼光），其光电响应接收条
件与标准观察者的色觉特性一致（比如10°视场）的条件下，用仪器方法测定颜色，
不但能够精确、定量地测定颜色和色差，而且比目测法更为科学客观，且不随时间、
地点、人员变化而发生变化。
    1.对仪器的般要求
    使用的测色仪器一般为光电积分型色差计，照明观察条件为o/d条件或d/o条件，
D65光源照明，10°视场，可直接测出三刺激值X、Y、Z，并能直接计算给出L<*>、a*、
b*和△E<*>及供试品溶液的色调色号。
    因溶液的颜色随着被测定的溶液液层厚度而变，所以除另有规定外，测量透射时，
应使用1cm厚度液槽。
    为保证测量的可靠性，应定期对仪器进行全面的检定。在每次测量时，要用无彩
色物质如水或空气对仪器进行校准，并规定它在所有波长下的透射率均为1.000。
    室温时，在D65为光源、10°视场条件下，水或空气的三刺激值分别为
                    X=94.81；Y=100.00；Z=107.32
    2.测定法
    除另有规定外，用水对仪器进行校准，取按各品种项下规定的方法分别制得的供
试品溶液和标准比色液，置仪器上进行测定。供试品溶液与水的色差值△E<*>应不超
过相应色调的标准比色液与水的色差值△E<*>。
    也可以将预先测定好的各色调色号的标准比色液对水的标准色差值△E<*>o输入到
仪器，然后直接测量供试品溶液对水的色差值△E<*>；若△E<*>值大于△E<*>o，则供
试品溶液颜色不合格；若△E<*>值小于等于△E<*>o，则供试品溶液颜色合格。


       


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